TIP nr. 03 Af Claudia Girnth-Diamba, 17. december 2009
Hvordan kan man opbevare gærstammer i længere tid i skolens fryser?
Introduktion
Gærorganismen kan godt tåle frysning hvis den får lidt frostvæske (glycerol), som forhindrer dannelse af iskrystaller, der ellers skærer membranerne i stykker.Frysevæske = YPD-glycerol
Afvej/afmål følgende stoffer, overfør dem til en 100 mL bluecap flaske, rør rundt eller ryst flasken og autoklaver 15 min ved 120 grader:
2 g glukose, 2 g pepton, 1 g yeast extract, 76 mL demineraliseret vand, 24 mL glycerol
Opskrift på nedfrysningsprocedure
Opformer stammen på YPD agar.
Fyld et sterilt eppendorfrør med 0,5 mL YPD-glycerol.
Tag en steril podepind og skrab en klump gærceller op.
Overfør klumpen til eppendorfrøret med YPD-glycerol.
Tag eventuel lidt mere, så mængden tilsammen bliver i størrelsesorden som en tandstikshoved.
Luk låget og ryst røret indtil gærcellerne er ligeligt fordelt i væsken.
Lad røret stå i mindst 3 timer og højst 24 timer. Ryst en gang imellem, da gærcellerne bundfælder.
Opbevar røret med stammen i fryseren i en lukket beholder (f.eks. et lille syltetjsglas).
Betingelser for opbevaringen
Gærstammer kan opbevares nemt i op til 4 år, men mange kan genoplives også efter endnu flere år (på Solrød Gymnasium har vi gjort det efter 10 år).Jo oftere man optør og genindfryser jo flere gærceller dør og det kan give problemer med genoplivning.
Man burde genindfryse stammer, som man har brugt til eksperimenterne og som har vist sig at give de "rigtige" resultater (se gærhæftet). Så har man en del rør at vælge imellem.
Forfatterne til gærhæftet er ved at lave en aftale med Frederiksen om at sælge stammerne i frysevæske. Se på volvoxdk forside under nyt i løbet af januar 2010.