TIP nr. 01 Af Claudia Girnth-Diamba, 16. december 2009
Hvad er reglerne for at arbejde med mikroorganismer i undervisningen?
Hvad skal man - hvad må man - hvad må man ikke - når man arbejder med mikroorganismer i undervisningen
Gær - Sacharomyces f,eks, cerevisia eller carlsbergensis
Gær er en mikroorganisme, som bruges i madlavning (bagergær) og i drikkevarer (øl, vin). Den er ikke farlig at arbejde med. Derfor er det tilladt at opbevare alle slags Sacharomyces species på skolen. Den vokser på maltagar og på YPD (agar med yeastekstract, pepton og glukose / dextrose). Mutantstammer, som bruges i hæftet ”Eksperimenter med gær til biologi og bioteknologi” af Nucleus (2008), er mutanter af Sacharomyces spec., dvs. de har en eller flere defekte gener. Defekterne betyder, at de ikke kan vokse på minimalagar kaldet YNB. I denne agar er den eneste nitrogenkilde en amin, som kun vildtypen kan omdanne til nitrogenholdige organiske stoffer (f.eks. proteiner, DNA , RNA, ATP). Opskrifter se TIP 10.
E.coli - bakterier, som kan købes fra godkendte forhandlere
Normalt bruges E.coli K12 varianter. Det er mutantstammer, som ikke kan sætte sig fast i tarmkanalen og som ikke kan nedbryde lactose. Man kan godt opbevare dem i ca.1 måned og ompode disse stammer 1-2 gange og man skal helst bruge en enkel klon. Problemet med ompodningen er, at agarplader nemt kan forurenes med andre potentielt sygdomsfremmende bakterie. Når man planlægger eksperimenter skal man derfor bestille stammerne ikke tidligere end 4 uger før. E.coli dyrkes bedst på LB agar, opskrifter se TIP 10.Gensplejsede E.coli, som SKAL købes fra BIONEER, link ……
Genslejsede colibakterier er bakterier, der indeholder genetisk modificeret plasmid DNA. Disse plasmider er specialdesignede til det formål at overføre visse gener mellem bakterier. Nogle plasmider kan også overføres til gær (for mere information om plasmidernes genom se gentek tips).Der findes også E.coli stammer, som indeholder naturligt forekommende plasmider. De er ikke klassificeret som GMO (genetisk modificerede organismer). Men når man arbejder med dem, skal man være særlig opmærksom på, at disse naturlige plasmider kan overføres til andre bakterier - og dermed også deres antibiotikaresistensgener.
Der gælder samme regler for gensplejsede E.coli som for ikke gensplejsede colibakterier - de må ikke opbevares længere end eksperimentets varighed og må helst ikke ompodes mere end 1-2 gange. Gensplejsede bakterier skal dyrkes på selektive medier, som f.eks. indeholder antibiotika (mere information se gentek tips).